Etapas específicas da cultura celular

1. Equipamento comum

1. Equipamento na sala de preparação

Destilador simples de água destilada, destilador duplo de água destilada, tanque de ácido, forno, panela de pressão, armário de armazenamento (armazenamento de artigos não esterilizados), armário de armazenamento (armazenamento de artigos esterilizados), mesa de embalagem.Equipamentos na sala de preparação de soluções: balança de torção e balança eletrônica (pesagem de medicamentos), medidor de PH (medição do valor de PH da solução de cultura), agitador magnético (configuração da sala de soluções para agitação da solução).

2. Equipamento da sala de cultura

Tanque de nitrogênio líquido, armário de armazenamento (armazenamento de artigos diversos), lâmpada fluorescente e lâmpada ultravioleta, sistema purificador de ar, geladeira de baixa temperatura (-80 ℃), ar condicionado, cilindro de dióxido de carbono, mesa lateral (escrita de registros de teste).

3. Equipamentos que devem ser colocados na sala estéril

Centrífuga (coleta de células), mesa de trabalho ultralimpa, microscópio invertido, incubadora de CO2 (incubação de cultura), banho-maria, máquina de desinfecção e esterilização com três oxigênios, geladeira de 4 ℃ (colocação de soro e solução de cultura).

2、 Operação asséptica

（1） Esterilização de sala estéril

1. Limpe a sala estéril regularmente: uma vez por semana, primeiro use água da torneira para limpar o chão, limpe a mesa e limpe a mesa de trabalho e, em seguida, use 3 ‰ lisol ou bromogeramina ou ácido peracético a 0,5% para limpar.

2. Esterilização da incubadora de CO2 (incubadora): primeiro limpe com 3 ‰ bromogeramina, depois limpe com álcool 75% ou ácido peracético 0,5% e depois irradie com lâmpada ultravioleta.

3. Esterilização antes do experimento: ligue a lâmpada ultravioleta, o esterilizador de três oxigênio e o sistema purificador de ar por 20-30 minutos, respectivamente.

4. Esterilização após o experimento: limpe a mesa ultra-limpa, a mesa lateral e a platina do microscópio invertido com álcool 75% (3 ‰ bromogeramina).

Preparação para esterilização do pessoal do laboratório

1. Lave as mãos com sabão.

2. Use roupas de isolamento, toucas de isolamento, máscaras e chinelos.

3. Limpe as mãos com uma bola de algodão com álcool 75%.

Demonstração de operação estéril

1. Todos os frascos de álcool, PBS, meio de cultura e tripsina trazidos para a bancada ultralimpa devem ser limpos com álcool 75% na superfície externa do frasco.

2. Opere perto da chama da lâmpada de álcool.

3. Os utensílios devem ser esterilizados antes do uso.

4. Os utensílios (como tampas de garrafas e conta-gotas) que continuam a ser utilizados devem ser colocados em local alto e ainda devem ser superaquecidos durante o uso.

5. Todas as operações devem ser realizadas próximas à lâmpada de álcool, e a ação deve ser leve e precisa, e não deve ser tocada aleatoriamente.Se o canudo não puder tocar no tanque de resíduos líquidos.

6. Ao aspirar mais de dois tipos de líquido, preste atenção à substituição do tubo de sucção para evitar contaminação cruzada.

Consulte o próximo capítulo para desinfecção de instrumentos.