Várias enzimas comumente usadas em experimentos de PCR

Reação em cadeia da polimerase, abreviada comoPCRem inglês, é uma técnica de biologia molecular usada para amplificar fragmentos específicos de DNA.Pode ser considerada uma replicação especial do DNA fora do corpo, que pode aumentar muito uma quantidade muito pequena de DNA.Durante todo oPCRNo processo de reação, uma classe de substâncias desempenha um papel vital – as enzimas.

1. DNA Taq

Em experimentos nos primeiros dias dePCR, os cientistas usaram a DNA polimerase I de Escherichia coli, mas há um problema com essa enzima: ela precisa repor uma nova enzima toda vez que um ciclo é realizado, o que torna as etapas da operação um pouco complicadas e é difícil de amplificar de forma totalmente automática.Este problema foi resolvido depois que os cientistas isolaram acidentalmente a DNA polimerase Taq de Thermus aquaticus em 1988. Desde então, a amplificação automática do DNA tornou-se uma realidade.A descoberta desta enzima também fazPCRtecnologia uma tecnologia conveniente, prática e universal.Atualmente, a Taq DNA polimerase é a polimerase mais comum em kits de DNA.

2. PfuDNA

Como mencionado acima, a Taq DNase tem um grande bug, então os cientistas modificaram a Taq DNA polimerase até certo ponto, a fim de evitar amplificação não específica devido à incompatibilidade, resultando em resultados de testes imprecisos.Mas a modificação da DNA polimerase Taq pode inibir a atividade da DNA polimerase à temperatura ambiente.A polimerase PfuDNA pode muito bem compensar as desvantagens acima da polimerase Taq DNA, de modo que a reação de PCR possa ser realizada normalmente e a taxa de sucesso da amplificação do gene alvo possa ser efetivamente melhorada.

3. Transcriptase reversa

A transcriptase reversa foi descoberta em 1970. Esta enzima usa RNA como molde, dNTP como substrato, segue o princípio do emparelhamento de bases e sintetiza uma fita simples de DNA complementar ao molde de RNA na direção 5'-3'.A transcriptase reversa depende principalmente da atividade da DNA polimerase a partir de modelos de DNA ou RNA e, portanto, não possui atividade de exonuclease 3'-5'.No entanto, possui atividade RNase H, o que limita até certo ponto o comprimento de síntese da transcriptase reversa.Devido à baixa fidelidade e termoestabilidade da transcriptase reversa selvagem, os cientistas também a modificaram.

ParaPCRexperimentos, os principais consumíveis são: tubo de PCR individual, tubo de PCR de 4/8 tiras, placas de PCR.

Labio'sConsumíveis de PCRtem o seguintevantagens:

Placas PCR: Ampla compatibilidade com termocicladores;Alto contraste e fácil identificação de poços;bem reflexão de fluorescência;bomtransferência de calor;DNase, RNase, DNA, inibidores de PCR certificados e testados como livres de pirogênios.

Tubos PCR individuais: Resistente à evaporação; bomtransferência de calor;excelente clareza óptica; DNase certificada, RNase, DNA, inibidores de PCR e testados como livres de pirogênio.

Tubos PCR de 4/8 tiras: Paredes ultrafinas; alta clareza; boa reflexão de fluorescência;pode ser usado na indústria farmacêutica, indústria alimentícia e biologia molecular; material PP virgem de alta qualidade; DNase, RNase, DNA, inibidores de PCR certificados e testados como livres de pirogênio.