Como usar o tubo de criopreservação de forma científica e correta
O uso do tubo de criopreservação é uma ciência, não uma simples trilogia como abrir o tanque de nitrogênio líquido, colocá-lo no tubo de criopreservação e fechar o tanque de nitrogênio líquido.O uso científico e correto de tubos de criopreservação pode evitar a perda de amostras e proteger a segurança dos testadores.
O uso do tubo de criopreservação é uma ciência, não uma simples trilogia como abrir o tanque de nitrogênio líquido, colocá-lo no tubo de criopreservação e fechar o tanque de nitrogênio líquido.O uso científico e correto de tubos de criopreservação pode evitar a perda de amostras e proteger a segurança dos testadores.
Tubo de congelamento: etapas de congelamento
Lave as células com solução PBS pré-aquecida, aspire a solução e cubra as células com uma solução contendo tripsina e EDTA (uma fina camada líquida é suficiente, e a concentração de tripsina e EDTA precisa ser determinada de acordo com a linha celular).
Incubar as células a 37 ℃ durante 3-5 minutos.
Após as células se separarem do fundo, a incubação é encerrada, o meio contendo soro é adicionado e as células são suavemente suspensas com uma pipeta.
Centrifugar a suspensão celular (500 xg, 5 min) e ressuspensão com meio contendo soro.
Contagem de células.
Centrifugar a suspensão de células (500 xg, 5 minutos), remover o sobrenadante e ressuspensar as células com meio contendo soro de volume apropriado.
Misture células e solução de criopreservação (60% de meio, 20% de soro bovino fetal, 20% de DMSO) na proporção de volume de 1:1 e, em seguida, transfira-as para o tubo de criopreservação Cryo STM.A densidade das células congeladas é de 1-5 × 106 peças/ml.
Recomenda-se que o tubo de criopreservação STM de células criogênicas esfrie a uma taxa de −1 K/min, e o tubo de criopreservação pode ser colocado em um recipiente contendo isopropanol a −70 ℃.Se o tubo de criopreservação Cryo STM armazena outras amostras, que podem ser colocadas diretamente a - 20 ℃, - 70 ℃ ou à fase gasosa do nitrogênio líquido.Para garantir que a amostra seja congelada uniformemente, 4 mL e 5 mL Cryo O tubo de criopreservação sTM precisa ser colocado na geladeira a - 20 ℃ durante a noite e depois transferido para a fase gasosa de - 70 ℃ ou nitrogênio líquido.
Em seguida, transfira o tubo de criopreservação Cryo.sTM para o tanque de nitrogênio líquido.Para evitar poluição (como micoplasma) e considerações de segurança, coloque o tubo de criopreservação Cryo.sTM na fase gasosa do nitrogênio líquido, não na fase líquida.
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Horário da postagem: 25 de novembro de 2022