Um tubo de centrífuga é um tubo simples que pode suportar alta velocidade de rotação e pressão, como a separação de algumas amostras e a separação de sedimentos sobrenadantes.O tubo da centrífuga de ultrafiltração possui duas partes semelhantes ao tubo interno e ao tubo externo.O tubo interno é uma membrana com um certo peso molecular.Durante a centrifugação de alta velocidade, aqueles com peso molecular menor vazarão para o tubo inferior (ou seja, o tubo externo) e aqueles com peso molecular maior ficarão presos no tubo superior (ou seja, o tubo interno).Este é o princípio da ultrafiltração e é frequentemente usado para concentrar amostras.
Tubos de centrífuga de ultrafiltração geralmente podem ser usados sem pré-tratamento, mas para processamento de amostras de proteínas, especialmente para soluções diluídas de proteínas (<10ug/ml), a taxa de recuperação da concentração com membranas de ultrafiltração muitas vezes não é quantitativa.Embora os materiais PES minimizem a adsorção inespecífica, algumas proteínas, especialmente quando são diluídas, podem apresentar problemas.O grau de ligação inespecífica varia com a estrutura das proteínas individuais.Proteínas contendo domínios carregados ou hidrofóbicos têm maior probabilidade de se ligar irreversivelmente a diferentes superfícies.O pré-tratamento de passivação na superfície do tubo de centrífuga de ultrafiltração pode reduzir a perda de adsorção de proteínas na superfície da membrana.Na maioria dos casos, o pré-tratamento da coluna antes de concentrar a solução proteica diluída pode melhorar a taxa de recuperação, porque a solução pode preencher os locais de adsorção de proteínas em branco expostos na membrana e na superfície.O método de passivação consiste em pré-embeber a coluna com um volume maior de solução de passivação por mais de 1 hora, lavar bem a coluna com água destilada e depois centrifugá-la uma vez com água destilada para remover completamente a solução de passivação que pode permanecer no filme .Tenha cuidado para não deixar o filme secar após a passivação.Se quiser usar mais tarde, é necessário adicionar água destilada estéril para manter o filme úmido.
Os tubos de centrífuga de ultrafiltração geralmente não podem ser esterilizados e reutilizados.Como o preço de um único tubo não é barato, muitas pessoas tentam reutilizá-lo – a experiência é limpar várias vezes a superfície da membrana com água destilada e centrifugá-la uma ou duas vezes.O pequeno tubo que pode ser centrifugado ao contrário pode ser imerso em água destilada e depois centrifugado ao contrário por mais vezes, o que será melhor.Pode ser usado repetidamente para a mesma amostra e pode ser embebido em água destilada quando não estiver em uso, mas a contaminação bacteriana deve ser evitada.Não misture amostras diferentes.Algumas pessoas dizem que a imersão em álcool 20% e NaOH 1n (hidróxido de sódio) pode prevenir o crescimento de bactérias e prevenir o ressecamento.Enquanto a membrana de ultrafiltração invadir a água, ela não pode secar.No entanto, outros dizem que isso destruirá a estrutura da membrana.De qualquer forma, os fabricantes geralmente não apoiam a reutilização.O uso repetido bloqueará o tamanho dos poros da membrana do filtro e até causará vazamento de líquido, o que afetará os resultados experimentais.
Horário da postagem: 05/09/2022