Introdução aos Meios de Cultura Microbiana Comuns (I)
O meio de cultura é um tipo de matriz nutritiva mista preparada artificialmente a partir de várias substâncias de acordo com as necessidades de vários crescimentos microbianos, que é usada para cultivar ou separar vários microrganismos.Portanto, a matriz de nutrientes deve conter nutrientes (incluindo fonte de carbono, fonte de nitrogênio, energia, sais inorgânicos, fatores de crescimento) e água que podem ser utilizados por microorganismos.Dependendo do tipo de microrganismo e do objetivo do experimento, existem diferentes tipos e métodos de preparo dos meios de cultura.
Alguns meios de cultura comuns no experimento são apresentados a seguir:
Meio de ágar nutricional:
O meio de ágar nutriente é utilizado para a propagação e cultura de bactérias comuns, para a determinação da contagem bacteriana total, preservação de espécies bacterianas e cultura pura.Os ingredientes principais são: extrato de carne, extrato de levedura, peptona, cloreto de sódio, ágar-ágar em pó, água destilada.A peptona e a carne em pó fornecem nitrogênio, vitaminas, aminoácidos e fontes de carbono, o cloreto de sódio pode manter a pressão osmótica equilibrada e o ágar é o coagulante do meio de cultura.
O ágar nutricional é o tipo mais básico de meio de cultura, que contém a maioria dos nutrientes necessários para o crescimento microbiano.O ágar nutricional pode ser usado para cultura bacteriana de rotina.
Meio de ágar sangue:
O meio de ágar de sangue é um tipo de meio de peptona de extrato de carne contendo sangue animal desfibrinado (geralmente sangue de coelho ou sangue de ovelha).Portanto, além de vários nutrientes necessários para o cultivo de bactérias, também pode fornecer coenzima (como fator V), heme (fator X) e outros fatores de crescimento especiais.Portanto, o meio de cultura de sangue é frequentemente usado para cultivar, isolar e preservar certos microrganismos patogênicos que são exigentes para nutrição.
Além disso, o ágar sangue é geralmente usado para teste de hemólise.Durante o processo de crescimento, algumas bactérias podem produzir hemolisina para quebrar e dissolver os glóbulos vermelhos.Quando crescem na placa sanguínea, anéis hemolíticos transparentes ou translúcidos podem ser observados ao redor da colônia.A patogenicidade de muitas bactérias está relacionada às características hemolíticas.Como a hemolisina produzida por bactérias diferentes é diferente, a capacidade hemolítica também é diferente e o fenômeno de hemólise na placa de sangue também é diferente.Portanto, o teste de hemólise é frequentemente usado para identificar bactérias.
Meio TCBS:
O TCBS é um meio de ágar tiossulfato, citrato, sal biliar e sacarose.Para isolamento seletivo de vibrio patogênico.Peptona e extrato de levedura são usados como nutrientes básicos no meio de cultura para fornecer fonte de nitrogênio, fonte de carbono, vitaminas e outros fatores de crescimento necessários para o crescimento de bactérias;A maior concentração de cloreto de sódio pode atender às necessidades de crescimento halofílico do vibrio;Sacarose como fonte de carbono fermentável;Citrato de sódio, ambiente alcalino de alto pH e tiossulfato de sódio inibem o crescimento de bactérias intestinais.O pó de bile de vaca e o tiossulfato de sódio inibem principalmente o crescimento de bactérias gram-positivas.Além disso, o tiossulfato de sódio também fornece uma fonte de enxofre.Na presença de citrato férrico, o sulfeto de hidrogênio pode ser detectado por bactérias.Se houver bactérias produtoras de sulfeto de hidrogênio, sedimentos pretos serão gerados na placa;Os indicadores do meio TCBS são azul de bromocresol e azul de timol, que são indicadores ácido-base.O azul de bromocresol é um indicador ácido-base com variação de pH de 3,8 (amarelo) a 5,4 (azul esverdeado).Existem duas faixas de descoloração: (1) a faixa ácida é de pH 1,2~2,8, variando de amarelo para vermelho;(2) A faixa alcalina é de pH 8,0~9,6, variando de amarelo a azul.
Meio de ágar de peptona de soja queijo TSA:
A composição do TSA é semelhante à do ágar nutriente.Na norma nacional, costuma ser utilizado para testar bactérias sedimentadoras em salas (áreas) limpas da indústria farmacêutica.Selecione o ponto de teste na área a ser testada, abra a placa TSA e coloque-a no ponto de teste.As amostras devem ser colhidas quando expostas ao ar por mais de 30 minutos por diferentes tempos e, em seguida, cultivadas para contagem de colônias.Diferentes níveis de limpeza requerem diferentes contagens de colônias.
Ágar Mueller Hinton:
O meio MH é um meio microbiano usado para detectar a resistência de microrganismos a antibióticos.É um meio não seletivo no qual a maioria dos microorganismos pode crescer.Além disso, o amido nos ingredientes pode absorver as toxinas liberadas pelas bactérias, portanto, não afetará os resultados da operação com antibióticos.A composição do meio MH é relativamente frouxa, o que é propício à difusão de antibióticos, de modo que pode mostrar uma zona de inibição de crescimento óbvia.Na indústria de saúde da China, o meio MH também é usado para teste de sensibilidade a medicamentos.Ao conduzir o teste de sensibilidade a drogas para algumas bactérias especiais, como Streptococcus pneumoniae, 5% de sangue de ovelha e NAD podem ser adicionados ao meio para atender a diferentes requisitos nutricionais.
Ágar SS:
O ágar SS é geralmente usado para isolamento seletivo e cultura de Salmonella e Shigella.Inibe bactérias gram-positivas, a maioria dos coliformes e proteus, mas não afeta o crescimento de salmonelas;Tiossulfato de sódio e citrato férrico são usados para detectar a geração de sulfeto de hidrogênio, tornando o centro da colônia preto;O vermelho neutro é o indicador de pH.A colônia produtora de ácido de açúcar fermentado é vermelha, e a colônia de açúcar não fermentado é incolor.Salmonella é uma colônia incolor e transparente com ou sem centro preto, e Shigella é uma colônia incolor e transparente.
Horário da postagem: 04 de janeiro de 2023