Introdução aos meios de cultura microbiana comum (I)

Introdução aos meios de cultura microbiana comum (I)

O meio de cultura é uma espécie de matriz nutritiva mista preparada artificialmente a partir de diversas substâncias de acordo com as necessidades de diversos crescimentos microbianos, que é utilizada para cultivar ou separar diversos microrganismos.Portanto, a matriz de nutrientes deve conter nutrientes (incluindo fonte de carbono, fonte de nitrogênio, energia, sal inorgânico, fatores de crescimento) e água que possam ser utilizados pelos microrganismos.Dependendo do tipo de microrganismo e da finalidade do experimento, existem diferentes tipos e métodos de preparação de meios de cultura.

Alguns meios de cultura comuns no experimento são introduzidos da seguinte forma:

Meio de ágar nutricional:

O meio ágar nutriente é utilizado para propagação e cultura de bactérias comuns, para determinação da contagem bacteriana total, preservação de espécies bacterianas e cultura pura.Os principais ingredientes são: extrato de carne bovina, extrato de levedura, peptona, cloreto de sódio, ágar em pó, água destilada.A peptona e o pó de carne bovina fornecem fontes de nitrogênio, vitaminas, aminoácidos e carbono, o cloreto de sódio pode manter a pressão osmótica equilibrada e o ágar é o coagulante do meio de cultura.

O ágar nutricional é o tipo mais básico de meio de cultura, que contém a maioria dos nutrientes necessários para o crescimento microbiano.O ágar nutricional pode ser usado para cultura bacteriana de rotina.

Meio ágar sangue:

O meio de ágar sangue é um tipo de meio peptonado de extrato de carne contendo sangue animal desfibrinado (geralmente sangue de coelho ou sangue de ovelha).Portanto, além de vários nutrientes necessários para o cultivo de bactérias, também pode fornecer coenzima (como o fator V), heme (fator X) e outros fatores de crescimento especiais.Portanto, o meio de hemocultura é frequentemente usado para cultivar, isolar e preservar certos microrganismos patogênicos que são exigentes em nutrição.

Além disso, o ágar sangue geralmente é usado para teste de hemólise.Durante o processo de crescimento, algumas bactérias podem produzir hemolisina para quebrar e dissolver os glóbulos vermelhos.Quando crescem na placa sanguínea, anéis hemolíticos transparentes ou translúcidos podem ser observados ao redor da colônia.A patogenicidade de muitas bactérias está relacionada com características hemolíticas.Como a hemolisina produzida por diferentes bactérias é diferente, a capacidade hemolítica também é diferente e o fenômeno da hemólise na placa sanguínea também é diferente.Portanto, o teste de hemólise é frequentemente usado para identificar bactérias.

Meio TCBS:

TCBS é meio ágar tiossulfato citrato sal biliar sacarose.Para isolamento seletivo de vibrio patogênico.Peptona e extrato de levedura são usados ​​como nutrientes básicos no meio de cultura para fornecer fonte de nitrogênio, fonte de carbono, vitaminas e outros fatores de crescimento necessários para o crescimento de bactérias;A maior concentração de cloreto de sódio pode atender às necessidades de crescimento halofílico do vibrio;Sacarose como fonte de carbono fermentável;Citrato de sódio, ambiente alcalino de alto pH e tiossulfato de sódio inibem o crescimento de bactérias intestinais.O pó de bile de vaca e o tiossulfato de sódio inibem principalmente o crescimento de bactérias gram-positivas.Além disso, o tiossulfato de sódio também fornece uma fonte de enxofre.Na presença de citrato férrico, o sulfeto de hidrogênio pode ser detectado por bactérias.Se houver bactérias produtoras de sulfeto de hidrogênio, será gerado sedimento preto na placa;Os indicadores do meio TCBS são azul de bromocresol e azul de timol, que são indicadores ácido-base.O azul de bromocresol é um indicador ácido-base com faixa de variação de pH de 3,8 (amarelo) a 5,4 (azul esverdeado).Existem duas faixas de descoloração: (1) a faixa ácida é de pH 1,2~2,8, mudando de amarelo para vermelho;(2) A faixa alcalina é de pH 8,0 ~ 9,6, mudando de amarelo para azul.

Meio de ágar peptona de soja com queijo TSA:

A composição do TSA é semelhante à do ágar nutriente.No padrão nacional, geralmente é usado para testar bactérias sedimentadas em salas limpas (áreas) da indústria farmacêutica.Selecione o ponto de teste na área a ser testada, abra a placa TSA e coloque-a no ponto de teste.As amostras devem ser colhidas quando expostas ao ar por mais de 30 minutos em tempos diferentes e depois cultivadas para contagem de colônias.Diferentes níveis de limpeza requerem diferentes contagens de colônias.

Ágar Mueller Hinton:

O meio MH é um meio microbiano usado para detectar a resistência de microrganismos a antibióticos.É um meio não seletivo no qual a maioria dos microrganismos pode crescer.Além disso, o amido nos ingredientes pode absorver toxinas liberadas por bactérias, por isso não afetará os resultados da operação antibiótica.A composição do meio MH é relativamente solta, o que favorece a difusão de antibióticos, de modo que pode apresentar zona óbvia de inibição de crescimento.Na indústria de saúde da China, o meio MH também é usado para testes de sensibilidade a medicamentos.Ao realizar testes de sensibilidade a medicamentos para algumas bactérias especiais, como Streptococcus pneumoniae, 5% de sangue de ovelha e NAD podem ser adicionados ao meio para atender a diferentes necessidades nutricionais.

Ágar SS:

O ágar SS é geralmente usado para isolamento seletivo e cultura de Salmonella e Shigella.Inibe bactérias gram-positivas, a maioria dos coliformes e proteus, mas não afeta o crescimento da salmonela;Tiossulfato de sódio e citrato férrico são usados ​​para detectar a geração de sulfeto de hidrogênio, tornando o centro da colônia preto;O vermelho neutro é o indicador de pH.A colônia produtora de ácido de açúcar em fermentação é vermelha e a colônia de açúcar não fermentado é incolor.Salmonella é uma colônia incolor e transparente com ou sem centro preto, e Shigella é uma colônia incolor e transparente.